Protocolli di laboratorio

 

Analisi DGGE del promotore

Protocollo segnalato da M. C. Rosatelli (Universitą di Cagliari).

 

Procedura:

 

Sequenza primers:

 

DGPC5     5'  (40GC) GGT GGA TTA GTC AAG TGT T 3'

PC3           5'   CTC CTC CTT TTC CCG ATG AT 3'

 

 

Condizioni di amplificazione:

 

denaturazione:           30 sec. 94°C

annealing:                   30 sec 52°C       x   30 cicli

extension:                   60 sec 72°C

 

 

utilizzare 10 pmol di ciascun primer

grandezza amplificato: 471 bp

 

 

Migrazione elettroforetica:

 

Range di denaturazione (%):     30-80

70 Volt

16h di corsa